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[农广天地]北虫草培育技术(20121217)
冬虫夏草因为药用价值高，滋补功效好，而家喻户晓。有一种虫草，不仅价值可以和冬虫夏草相媲美，而且还可以人工规模化栽培。这就是北虫草。北虫草，学名叫蛹虫草。是冬虫夏草的一个亲姐妹，同属于真菌门，子囊菌纲，肉座菌目，麦角菌科，虫草菌属。是虫草菌属的模式种。北虫草刚收获时，样子有点像菌类，烘干后的北虫草更像草。是一种药、食两用真菌，可以全草入药，具有药用价值和滋补功能。 本期节目就向朋友们北虫草种植技术。
专家意见：据了解，在虫草属的６０多个种中，惟有冬虫夏草和北虫草的医疗价值最大、经济价值最高，所以在冬虫夏草野生资源大幅度减少、且无法进行商品化人工栽培的情况下，北虫草便成了国内外医药界、保健食品界、生物界等各领域的宠儿。但北虫草的生长需要严格的温度、湿度和光照控制，要求温度保持在15℃—20℃，还要有专门的设施设备。如果一点生物知识都没有，也没有懂北虫草种植技术的人做技术后台、技术指导，普通老百姓很难栽培成功。需要强调指出的是，北虫草万不可随便引种，无限扩繁。
相关新闻资料：
在太平地镇牤牛营子村，2009年仅有一户生产，发展到现在已经有63户，并且由庭院生产转变为规模化集中发展。
每个北虫草生产棚占地一般为10*20㎡，最长不超过50延长米。每平米50盆摆放在角钢焊制的10层架子上，除了暖棚设施外，还需要供暖锅炉、灭菌锅炉、蒸锅各一台/套，烘干室、接菌室各一间，照明、取暖设备一套。
2012年，为了满足牤牛营子村群众自发扩大北虫草生产规模的需求，太平地镇党委、政府协调各有关单位和农户，在牤牛营子村西山规划高标准北虫草产业园区1000亩，其中规划建设300栋500㎡恒温大棚及配套设施，占地900亩；规划建设科技培训室、成果展示厅、来宾接待室、管理办公室等，占地50亩；规划建设分级室和接菌室，每个建筑面积7500㎡，规划建设3000㎡冷藏库一座，规划建设10000㎡产品精深加工车间一栋，共占地50亩。目前园区正在紧张施工建设中。
在围场县棋盘山乡，十八号村李春富今年投资30万元种植北虫草1.2万盆，每盆成本6-7元，每盆出干品约2两。回收价在130元/公斤（自己外销高可达到200元/公斤）。每盆毛利润在45元左右。当年可见纯利润10多万元。可见北虫草的养殖效益显著。
参考技术资料：
北虫草又称蛹虫草，属子囊菌类的麦角菌目、麦角菌科。近年来野生资源日渐匮乏，而人工栽培的北虫草以良好的医疗保健功效深受消费者欢迎。笔者经多年试验，研究出了简便、不易污染、投资少、以大米为主要原料、用塑料袋栽培北虫草的新技术。
一、原材料要求
1、选用菌丝洁白、适应性强、见光后转色、出草快、性状稳定的速生高产优质菌种，是栽培成功和高效的关键。初学者应选购菌种量多的固体原种，有栽培经验者可购买斜面试管种或液体菌种。
2、选用新鲜无霉变、无污染的大米或碎玉米。
3、选用厚度0.05毫米以上，规格为15厘米×30厘米或17厘米×30厘米，薄厚均匀、无破漏、韧性强的优质聚丙烯塑料袋为栽培容器。
4、为防治污染损失，可选用集营养、防污、助长功效于一体的虫草专用防污剂，如食用菌专用特效防污剂。
二、北虫草种植方法
1、培养基配方：大米1千克，虫草专用防污剂35克，水1.5千克。
2、配制方法：大米按每袋50克或100克分装入塑料袋。将1.5升50℃的热水倒入干净盆内，将虫草专用防污剂放入热水中，搅至完全溶解即成营养液。按料水比（即大米与营养液的用量比）1克:1.5毫升称取营养液倒入装好大米的塑料袋内。分装完后用塑料绳将每个塑料袋中部和口部各扎一道。
3、灭菌：灭菌锅内加适量水，把培养料袋放入灭菌锅，升温至100℃，保持1小时。取出，冷却后移入接种室。用优质气雾消毒剂或常规方法密闭消毒30分钟，即可穿戴消毒衣服进入接种室接种。
4、接种：进入接种室应迅速关好门（防止含有杂菌的空气进入）。接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭或浸沾消毒。现介绍易推广的用固体大米菌种接种的方法：
①试管原种的转扩栽培：拔去试管塞后用消毒的接种钩挖取豆粒大小的菌种2-3块，接入培养基面上，稍扎紧袋口即可。②用原种转扩栽培袋时，先将菌种捣成指头或豆粒大小块状，每袋接入5-10克菌种，均匀分布在料面上。如条件允许可适当增加接种量，以利菌丝较快生长。接种完后按原扎口方法稍扎紧袋口，即可移入经杀菌和防虫处理的培养室内培养。
5、培养：北虫草属中低温菌类，菌丝生长温度范围为5-30℃，菌丝最适生长温度为15-25℃，子座最适生长温度为18-22℃。最初将温度保持15-18℃遮光培养。当菌丝生长至培养基1/2-2/3时，可将温度升至20℃，20天菌丝可发满袋。几天后，当培养基上部出现菌丝突起时，给予10-15℃的温差刺激，并增加光照刺激转色。7-10天转完色后对培养室消毒30分钟，然后解去培养料袋中部扎绳，用手把袋折成直筒状，为子座生长提供空
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[每日农经]分类卖的北虫草(20120316)
北虫草相信大家现在都不陌生了，北虫草是北冬虫草的简称，也叫蛹虫草或蛹草，俗名不老草，是虫、菌结合的药用真菌，现代珍稀中草药。北冬虫夏草属于真菌门，子囊菌纲，肉座菌目，麦角菌科，虫草属。它主要生长在我国的北方地区。北虫草不仅含有丰富的蛋白质和氨基酸，而且含有30多种人体所需的微量元素，是上等的滋补佳品，北虫草是传统冬虫夏草的最理想代用品。目前大家只是对北虫草的品种和种植情况了解一些但对北虫草的销售模式和市场还不太清楚，本片将介绍京郊大兴北虫草种植户根据北虫草的特点和市场的需求将收获的北虫草分鲜虫草和干虫草分开销售，取得了不错的收益。分开销售的北虫草一是鲜虫草，带鲜艳的橙黄色，泡茶、浸酒、煮菜皆宜，营养全，功效好，但价钱贵且不耐储存；另外一种是经烘烤或晾晒过的干草，也可按新鲜方法吃，产品价格适中，耐储存，市场上多数是这种产品。
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一、项目概况
1、项目名称：蛹虫草工业化栽培与深加工
2、项目承办单位：xx信息科技有限公司
xx科技有限公司
3、项目建设地点：xx省xx市
4、项目负责人：xx
5、建设规模：年产虫草胶囊口服液33.6吨、虫草酒768吨、虫草素67公斤及有关营养保健品。
6、项目总投资：5800万元
7、建设年限：1.5年
二、项目的提出和背景
2.1、项目的提出。
2.1.1 蛹虫草生物学简介
虫草是我国的一种名贵野生中药材，具有补虚损、益精气、保肺、益肾、止血化痰、滋补强壮等功效。与人参、鹿茸一起列为中国三大补药。如一七五七年《本草从新》中就有“冬虫夏草甘平保肺，益肾，补精髓，止血化痰，已劳咳，治膈症皆良“的记载。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳萎遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。全世界已知虫草类有350余种，我国目前有62种，但最为昂贵的只有冬虫草和北虫草。古语曰：宁要虫草一把，不要金玉满车；民间则称之为“活黄金“。 蛹虫草（又名北虫草、北冬虫夏草，）( C.militaris(L.)Link )，蛹虫草为子囊菌亚门，麦角菌目，
麦角菌科、虫草属的模式种，学名为Cordyceps militaris，世界性分布天然资源数量很少。由子座（即草部分）与菌核（即虫的尸体部分）两部分组成的复合体。冬季幼虫蛰居土里，菌类寄生其中，吸取营养，幼虫体内充满菌丝而死。到了夏季，自幼虫尸体之上生出幼苗，形似草，夏至前后采集而得。国内于1958年在吉林省首次发现，通过鉴定，认为它与冬虫夏草(Cordyceps Sinensis(Berk.)Sacc.)是同一个属，定名为 蛹草(C. militaris(L.)Link )。主产于云南（昆明、安宁、江川）、吉林（安图、永吉）、辽宁（沈阳）、内蒙古（哲里木盟），生于针、阔叶林或混交林地表土层中鳞翅目昆虫的蛹体上。能采用家蚕和柞蚕蛹人工批量培育，药效、药理与野生种相似甚至更好。 北虫草较之冬虫夏草，具有几个无可比拟的优点：一是北虫草为虫草属的模式种，分布广泛，为世界各国学者所认识和接受。二是北虫草已在人工条件下育成了完整子座。三是北虫草含有虫草菌素（又名虫草素Cordycepin，即3ˊ-Dexyadenosine C10H13O3N5）和虫草多糖，其独特药理作用已日益引起药学界的高度重视。由于蛹虫草具有以上优点，成为虫草属中药用虫草菌中的佼佼者。 由于野生虫草资源稀缺，价格昂贵，难于普及。采用生物工程技术方法人工培养蛹虫草，在高科技营造的环境里，虫草的生长过程不受自然界不利条件的影响，有效成份不受损失，品质优良。
2.1.2 经中国科学院沈阳应用生态研究所检测：人工培养虫草的主要营养与药用成分均与野生虫草的含量相当甚至更高。
蛹虫草人工培养技术的成功，为我国开辟了名贵药材产业化生产的又一片天空。 现代科学论证蛹虫草不仅具有特殊的营养价值，而且有明显的药用价值。
2.2、 项目的背景：
2.2.1 蛹虫草人工栽培及产品开发研究概况
国外最早见于报道是1723年Vaillant在
《Botanicon Parisiense》一书中，发表了蛹虫和大团囊虫草，其后在20世纪30一60年代，日本等国研究人员分别做了一些生态调查和驯化、人工栽培的研究。我国这方面的研究是从20世纪80年代开始的，并且在人工栽培、化学成分、药理等方面做了大量的研究，取得了一些成果。认为蛹虫草完全可以作为资
源极缺的冬虫夏革的代用品。
1固体栽培
1986年吉林省蚕业研究所以家蚕和柞蚕为寄主培养蛹虫草成功获得子实体［2］。后来蛹虫草先后在柞蚕和桑蚕活蛹、家蚕、蓖麻蚕蛹以及樗蚕蛹为寄主在室内种植蛹虫草成功[3，4]。陈顺志等[5]。瓶栽蛹虫草成功，并提出子座的色泽与光线强弱有关；郑晴霞等[6]首次将蛹虫草菌直接在培养基上，并长出子座；而且提出可以直接液体培养菌丝体。姜明兰等[7]用野生菌进组织分离，在PDA培养基上分离、纯化出优良的原种。经人工驯化的原种在PDA液体培养基中扩大培养后，接种到大米培养基上，在一定条件下获得先端膨大呈棒状的子实体。张显科等[8]研究认为高粱米，小米，玉米渣和蚕蛹可以代替大米栽培蛹虫草，后来刘守华等[9]实验得出大米加猪血培养基更适宜虫草菌丝的生长，使产量有所提高。冉翠香等[10]发现人工蛹虫草培育成功的关键在于诱发子实体原基的形成，认为温差刺激对子实体原基形成的效果较好。
2液体培养
天然蛹虫草资源稀少，人工固体栽培周期长，也不易控制条件。通过液体深层培养法获得虫草菌丝体丝体的化学组成与从天然采集的虫草的化学组成接近，而且可以从发酵液中得到人们需要的物质，还能大大缩短生产周期。邵爱娟等[11]研究得出虫草菌丝的最适生长温度为20～25０c。在进行菌丝发酵时碳源以蛋白胨为最优，采用1：2或1：3的碳氮比较为合适。李宗军等［１２］正交实验表明，发酵最佳培养基组成是：5％大米粉、1．5％豆饼粉、1．5％麦芽粉、0．1％KH2P04，0．05％MgS04．7H20。
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一、项目概况
1、项目名称：蛹虫草工业化栽培与深加工
2、项目承办单位：xx信息科技有限公司
xx科技有限公司
3、项目建设地点：xx省xx市
4、项目负责人：xx
5、建设规模：年产虫草胶囊口服液33.6吨、虫草酒768吨、虫草素67公斤及有关营养保健品。
6、项目总投资：5800万元
7、建设年限：1.5年
二、项目的提出和背景
2.1、项目的提出。
2.1.1 蛹虫草生物学简介
虫草是我国的一种名贵野生中药材，具有补虚损、益精气、保肺、益肾、止血化痰、滋补强壮等功效。与人参、鹿茸一起列为中国三大补药。如一七五七年《本草从新》中就有“冬虫夏草甘平保肺，益肾，补精髓，止血化痰，已劳咳，治膈症皆良“的记载。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳萎遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。全世界已知虫草类有350余种，我国目前有62种，但最为昂贵的只有冬虫草和北虫草。古语曰：宁要虫草一把，不要金玉满车；民间则称之为“活黄金“。 蛹虫草（又名北虫草、北冬虫夏草，）( C.militaris(L.)Link )，蛹虫草为子囊菌亚门，麦角菌目，
麦角菌科、虫草属的模式种，学名为Cordyceps militaris，世界性分布天然资源数量很少。由子座（即草部分）与菌核（即虫的尸体部分）两部分组成的复合体。冬季幼虫蛰居土里，菌类寄生其中，吸取营养，幼虫体内充满菌丝而死。到了夏季，自幼虫尸体之上生出幼苗，形似草，夏至前后采集而得。国内于1958年在吉林省首次发现，通过鉴定，认为它与冬虫夏草(Cordyceps Sinensis(Berk.)Sacc.)是同一个属，定名为 蛹草(C. militaris(L.)Link )。主产于云南（昆明、安宁、江川）、吉林（安图、永吉）、辽宁（沈阳）、内蒙古（哲里木盟），生于针、阔叶林或混交林地表土层中鳞翅目昆虫的蛹体上。能采用家蚕和柞蚕蛹人工批量培育，药效、药理与野生种相似甚至更好。 北虫草较之冬虫夏草，具有几个无可比拟的优点：一是北虫草为虫草属的模式种，分布广泛，为世界各国学者所认识和接受。二是北虫草已在人工条件下育成了完整子座。三是北虫草含有虫草菌素（又名虫草素Cordycepin，即3ˊ-Dexyadenosine C10H13O3N5）和虫草多糖，其独特药理作用已日益引起药学界的高度重视。由于蛹虫草具有以上优点，成为虫草属中药用虫草菌中的佼佼者。 由于野生虫草资源稀缺，价格昂贵，难于普及。采用生物工程技术方法人工培养蛹虫草，在高科技营造的环境里，虫草的生长过程不受自然界不利条件的影响，有效成份不受损失，品质优良。
2.1.2 经中国科学院沈阳应用生态研究所检测：人工培养虫草的主要营养与药用成分均与野生虫草的含量相当甚至更高。
蛹虫草人工培养技术的成功，为我国开辟了名贵药材产业化生产的又一片天空。 现代科学论证蛹虫草不仅具有特殊的营养价值，而且有明显的药用价值。
2.2、 项目的背景：
2.2.1 蛹虫草人工栽培及产品开发研究概况
国外最早见于报道是1723年Vaillant在
《Botanicon Parisiense》一书中，发表了蛹虫和大团囊虫草，其后在20世纪30一60年代，日本等国研究人员分别做了一些生态调查和驯化、人工栽培的研究。我国这方面的研究是从20世纪80年代开始的，并且在人工栽培、化学成分、药理等方面做了大量的研究，取得了一些成果。认为蛹虫草完全可以作为资
源极缺的冬虫夏革的代用品。
1固体栽培
1986年吉林省蚕业研究所以家蚕和柞蚕为寄主培养蛹虫草成功获得子实体［2］。后来蛹虫草先后在柞蚕和桑蚕活蛹、家蚕、蓖麻蚕蛹以及樗蚕蛹为寄主在室内种植蛹虫草成功[3，4]。陈顺志等[5]。瓶栽蛹虫草成功，并提出子座的色泽与光线强弱有关；郑晴霞等[6]首次将蛹虫草菌直接在培养基上，并长出子座；而且提出可以直接液体培养菌丝体。姜明兰等[7]用野生菌进组织分离，在PDA培养基上分离、纯化出优良的原种。经人工驯化的原种在PDA液体培养基中扩大培养后，接种到大米培养基上，在一定条件下获得先端膨大呈棒状的子实体。张显科等[8]研究认为高粱米，小米，玉米渣和蚕蛹可以代替大米栽培蛹虫草，后来刘守华等[9]实验得出大米加猪血培养基更适宜虫草菌丝的生长，使产量有所提高。冉翠香等[10]发现人工蛹虫草培育成功的关键在于诱发子实体原基的形成，认为温差刺激对子实体原基形成的效果较好。
2液体培养
天然蛹虫草资源稀少，人工固体栽培周期长，也不易控制条件。通过液体深层培养法获得虫草菌丝体丝体的化学组成与从天然采集的虫草的化学组成接近，而且可以从发酵液中得到人们需要的物质，还能大大缩短生产周期。邵爱娟等[11]研究得出虫草菌丝的最适生长温度为20～25０c。在进行菌丝发酵时碳源以蛋白胨为最优，采用1：2或1：3的碳氮比较为合适。李宗军等［１２］正交实验表明，发酵最佳培养基组成是：5％大米粉、1．5％豆饼粉、1．5％麦芽粉、0．1％KH2P04，0．05％MgS04．7H20。
第24卷第1期 辽宁石油化工大学学报Vol.24 No.1
2004年3月JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFPETROLEUM&CHEMICALTECHNOLOGY Mar.2004
文章编号:1672-6952(2004)01-0019-03
北虫草液体培养基的研究
王战勇1, 张建东2, 李 莹3, 苏婷婷1, 杨翔华1
(1.辽宁石油化工大学石油化工学院,辽宁抚顺113001;2.抚顺石化公司远航医院,辽宁抚顺113001;
3.北华大学林学院林学系,吉林吉林132013)
摘 要: 为选取北虫草的最适液体培养基,以三因素三水平的正交试验设计培养北虫草的液体培养条件,北虫草菌种的接种量为5%(体积分数)。培养条件为18℃,pH为6.5,转速为120r/min,72h。通过对培NH4NO3,无机离子最优水平为K2HPO4。),NH4NO3,K2HPO4分别为20,1,1g/L。根据数据分析的R值和F:,平,所以培养北虫草应该选取最优葡萄糖水平。。
关键词: 北虫草; 中图分类号:LiquidMediumonCordycepsMilitaris
WANGZhan-yong1,ZHANGJian-dong2,LIYing3,SUTing-ting1,YANGXiang-hua1
(1.SchoolofPetrochemicalTechnology,LiaoningUniversityofPetroleum&ChemicalTechnology,FushunLiaoning113001,China;2.YuanhangHospital,FushunPetrochemicalCompany,FushunLiaoning
113001,China;3.SchoolofForest,BeihuaUniversity,JilinJilin132013,China)
Abstract: TheoptimumliquidmediumonCordycepsmilitariswaschosen.Theorthogonalexperimentwasmadewiththreefactorsandthreelevelsofnutrientconcentrationtoinvestigatetheoptimumliquidculturecondition.Thequantityofinoculationis5%.Thecultureconditionsarethattemperatureis18℃,pHis6.5,circlevelocityis120r/min,culturetimeis72h.Afterthetestandanalysisofthedesiccantweightsofthemycelium,glucosewasbeenchosenasthebestlevelofcarbon,NH4NO3wasbeenchosenasthebestlevelofnitrogen,andK2HPO4wasbeenchosenasthebestlevelofinorganicion.Theoptimumliquidmediumprescriptionisglucose20g/L,NH4NO3(1g/L),K2HPO4(1g/L).Formtheanalysisofthedata,itcanbesurethatcarbonisthemostimportantfactor.Soitshouldchoosethebestlevelofglucose.Theresultofthestudycansupplyimportantprooftoculturecordycepsmilitarisinthelargerlevelinthenext.
Keywords: Cordycepsmilitaris;Liquidmedium;Mycelium
北虫草(Cordycepsmilitaris)在天然和完全人
工条件下,北虫草子实体的获得具有周期长、培养条件复杂等困难[1,2]。据有关文献报道[3,4],采用液体培养的方法获得虫草菌的菌丝体,其内所含的主要成分与天然子实体十分接近,而且具有条件简单、产量高、周期短等特点。通过对虫草菌液体培养基的几种重要成分进行统计学分析,获得各因素、水平之
收稿日期:2003-06-18
作者简介:王战勇(1978-),男,辽宁抚顺市,助教。
间的最合理搭配,寻求培养北虫草的最适宜的培养基,为进一步研究虫草的应用提供依据[5,6]。
1 材料与方法
1.1 实验材料
菌株来源:由本实验室保存的菌株。
培养基的组成:母种培养基为PDA培养基,试验用9种不同的液体培养基具体配方见表1、2。
实验设备:LD5—10型离心机(
北京医用离心
20 辽宁石油化工大学学报 第24卷
表2 试验方案
试验号【北虫草养殖方法】
碳源
123
111222333
机厂);101-2型电热实验干燥箱(上海仪器总厂);
不锈钢电热手提消毒器(上海申安医疗器械厂);F-1004分析天平(上海天平仪器厂);SW-CJ-1C
水平氮源
12312312无机离子
123231312
型医用净化工作台(上海阳光实验仪器有限公司);HZ-24回旋振荡摇床(朝阳恒温仪器厂)。
表1 因素水平
因素
水平
123
ρ碳源(
/(g・L-1))
ρ氮源(
/(g・L-1))NH4NO3(1)
ρ无机离子(
/(g・L-1))K2HPO4(1)MgSO4(0.5)FeSO4(0.05)
456789
葡萄糖(20)蔗糖(20)玉米粉
(10)
蛋白胨(5)酵母粉(5)
1.2 实验方法[7,8]
1.2.1菌种的活化 转接至装有50mL已灭菌的100mL,18
℃,120r/min721.2.2 将上述活化后的菌
种转接至同样的液体培养基中,接种体积分数为5%的菌种,即每瓶内接2.5mL液体菌种,18℃,120r/min摇床培养。每隔24h取两瓶,使用离心
机3000r/min离心分离培养液20min,去除上清液,60℃烘干离心所得菌丝体24h,称取菌丝体干重并取平均值。测定该菌种的最适生长曲线。1.2.3正交试验 正交试验设计的依据是微生物
图1 培养时间与菌丝体干质量的关系
2.2 正交试验结果
生长的营养需求,设计试验的因素和水平,以三因素三水平进行,见表1。从中选取碳源、氮源、无机离子的最佳搭配方案。
按表2配方配制9种培养基,装液量为50mL,调节pH到6.5,灭菌。无菌条件下接种,18℃,120r/min摇床培养72h。以3000r/min离心分离培
正交试验实验数据见表3。正交试验结果见表
4。表3中∑xn=2.1368(n=9), xi=0.2374。
表3 正交实验结果统计
实验号
1
123456
0.68790.21170.39390.19220.20510.43500.06650.07180.0530
20.76810.21350.32890.04110.19650.48900.12120.07170.0436
30.65180.20740.25700.21660.14670.25610.09860.15760.1010
40.53120.13500.24020.10240.12370.45720.16540.02410.0590
菌丝体干质量/g
平均值
0.65980.19190.30500.14840.16800.40530.11290.08130.0642
养液20min,去除上清液,用质量分数为0.8%生理盐水反复洗涤后,60℃烘干24h,称取菌丝体干质量。如上步骤,再重复3次,获得4组数据,取平均值。
2 结果与讨论
2.1 最佳生长时间
789
培养时间与菌丝体干质量的关系结果如图1所示。由图1可知,在其他条件不变时,培养3
d即72h为最佳培养时间。
第1期 王战勇等.北虫草液体培养基的研究21
由表4数据分析可知:比较碳源因素Kn值,K1值最大,说明其最优水平为1(葡萄糖)。同理氮源因素最优水平1(NH4NO3),无机离子因素最优先水平为1(K2HPO4);碳源因素的R值最大,因素的极差越大,说明该因素变动对结果的影响越大,即碳
表4 正交实验结果分析计算
计算
K1K2K3
源因素为最重要的营养因素。根据表4中值的大小,排列出试验因素的主次顺序为:碳源→无机离子→氮源。
方差分析结果见表5。各因素F12(0.05)均为19。由表5可知碳源因素的F值最大,氮源因素的
F值最小。F数值较大时表明该因素采取不同的
碳源
1.15610.72190.25840.38540.24060.08610.2663
氮源
0.92110.44120.77450.30700.14710.25820.1599NH4NO3
无机离子
1.14640.40450.48590.38200.13480.16200.2472K2HPO4
水平对实验结果影响显著,所以对碳源因素应控制在最优水平上(即葡萄糖最优水平上)。而氮源因素F值较小,则取任一水平,对结果影响不大。这与直观分析的结果基本一致。
综合实验结果与数据分析,在相同培养条件下碳源最优水平为1(葡萄糖),氮源的最优水平为1(NH4NO3)营养因素,1(K2HPO4)(质量浓度H4,20,1,1g/L。值均可以确定:碳源因素,应控制在最优水平,所以培养北虫。
K1 K2 K3
R
最优葡萄糖
注:Kn, Kn分别代表以n及其平均数,R表5 方差分析表
分析因素
碳源
SDMF
变异来源氮源
0.040320.02020.4891
无机离子
0.064020.03200.7748
0.082520.0413
0.32098
误差
0.134120.06711.625
总变异
注:S代表平方和,D代表自由度,M代表均方,F代表方差。
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(下转第25页)
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(Ed.:ZZH,W)
创业（商业）计划书
公司名称：益年生物科技股份责任有限公司 公司主营：_种植与销售蛹虫草
负责人： 员利祯________________
2012年9月
（一）公司简介
吉林益年生物科技（股份）有限公司（以下简称公司）是一家筹建中的生物科技企业，公司位于吉林省长春市净月开发区。它以保健圣品——冬虫夏草神奇的保健疗效与目前广阔的出售市场需求为创业重点，以拥有自主知识产权的大批量繁殖优质的冬虫夏草为主打产品，以维护人类健康为导向，主要从事冬虫夏草的养殖和销售。公司以各种虫草收购公司、保健品公司、医药研发公司以及化妆品公司为服务市场，充分利用吉林农业大学强大的科研实力，努力推进高校高新技术和科研成果的产业化。
公司成立初期主要采用专利技术批量生产冬虫夏草，为国内从事保健品研究，医药研究，化妆品开发的各级医疗机构、科研院所提供相应产品，解决冬虫夏草市场紧俏。供不应求，有价无市的问题。
公司将以此为基础，不断扩大研发领域，增加产品类型，除冬虫夏草的种植以外，同时进行研究对其有效成分的大量提取技术，并根据其功效制成相关的保健品，美容商品，力求建立一个集产品研发、市场销售、科研服务为一体的综合性生物科技专业化产业实体。
（二）市场描述
据医学科学分析，虫草体内含虫草酸。维生素B12、脂肪、蛋白等。虫草性甘、温平、无毒，是著名的滋补强壮药，常用肉类炖食，有补虚健体之效。适用于治疗肺气虚和肺肾两虚、肺结核等所致的咯血或痰中带血、咳嗽。气短、盗汗等，对肾虚阳痿、腰膝酸疼等亦有良好的疗效，也是老年体弱者的滋补佳品。现代医学临床研究表明，冬虫夏草吞噬肿瘤细胞的能力是硒的4倍，冬虫夏草所含虫草素能明显增强红细胞粘附肿瘤细胞的能力，抑制肿瘤生长和转移，能明显提升白血球和血小板数量，迅速改善放化疗后的呕吐恶心、胃口差、头发脱落、失眠等症状。在中国，福临门冬虫夏草生长于海拔4200高的西藏那曲地区，由于其天然虫草素含量较高，因此抗癌效果更为显著。在美国，已将冬虫夏草列为抗肿瘤新药，进入临床三期。
前两年，中科院组织的一项实地考察结果显示，被称为“软黄金”的冬虫夏草在主产区，大部分地区冬虫夏草的产量不到25年前的10%，原分布密集区40%地块已经多年未发现生长冬虫夏草。同样的数据显示，上世纪70年代，在青藏高原，曾经有过1平方米挖出102根冬虫夏草的记录。可到了今天，别说1平方米，就是在几十、甚至上百平方米的草甸内，有时也很难觅到1根冬虫夏草。上世纪50年代，我国冬虫夏草的年产量曾经在200吨以上，
60年代初为150多吨，而到了90年代则下降到100吨左右。
冬虫夏草作为宝贵的中药资源，重视对它的保护和开发，寻求通过人为干预促进其生存繁衍的新途径，实现冬虫夏草资源的可持续利用，是当务之急。
公司主推产品“蛹虫草”的主要市场是全国各级肾病治疗医院、各级保健院、各省医药厂、各省美容机构等各类专业从事保健和疾病研究、治疗的机构及适合免疫力低下、年老体弱多病的人群，对产后体虚者和亚健康状态者更是一种难得而有益的营养补充食品。
冬虫夏草对于以下几种人群都有比较显著的疗效：
1.工作节奏紧张繁忙、经常加班出差、精神压力大、易疲劳者。
2． 肾病及肾功能不全、肾功能低下患者。
3． 慢性支气管炎、哮喘病及肺病患者。
4． 肝病患者。
5． 心脑血管病患者。
6． 长期服用药物及吸烟、酗酒的人。
7． 肿瘤患者。
8． 免疫功能低下、容易感冒、容易过敏、睡眠质量差以及衰老过快的人。
9． 中老年人以及缺乏运动、身体虚弱、身软乏力的人。
10．糖尿病患者。
11．食欲不振、消化吸收功能差者。
12．分娩后的产妇。
（三）投资与财务
吉林益年生物科技有限公司是一家多元化投资主体的股份有限责任公司。各股东根据所持股份对公司享受相应的权利和承担相应的义务，公司注册资本为500万元（RMB，下同），注册地为长春市净月开发区。
资金筹集：吉林农业大学生命科学学院技术入股100万元；引入两到五家风险投资商，拟筹集资金300万元；管理团队投资，拟筹集资金100万元。以上三方共计筹集资金500万元；此外，建设期向银行贷长期借款125万元，次年再次向银行贷长期借款325万元。
资金用途：建设期，生产设备投资350万元，200万元用作前期流动资金。销售过程中，75万元用于宣传推销。
股本规模及结构：公司注册资本500万元。吉林农业大学生命科学学院资金及技术投资
共计100万元，占总股本20%；风险投资入股300万元，占总股本60%；管理团队投资100万元，占总股本20%。
公司预计2011年开始盈利，平均年销售净利润为1000万元，静态投资回收期为0.95年，动态投资回收期为1.18年。
风险资本将在2014年左右以协议转让的方式退出。
（四）创业团队
员利祯 ，女，团员 ， 系吉林农业大学生命科学学院2011级制药工程专业学生，任公司总经理。
赵金乔，男，团员，系吉林农业大学生命科学学院2011级制药工程专业学生，分管公司技术部。
牛永梅，女，团员，系吉林农业大学生命科学学院2011级制药工程专业学生，分管公司人力部。
陈爽，女，团员，系吉林农业大学生命科学学院2010级生物工程专业学生，分管公司销售部。
（五）营销策略
冬虫夏草是我国传统名贵滋补药材之一，素与人参、鹿茸齐名，被称之为“中药三宝”， 由于众所周知的原因，蝙蝠蛾昆虫生长的环境日益恶劣，生长量逐年减少，再加上开采过度，使冬草夏草濒临灭绝，成为稀缺品，市场价格大幅飚升，经科学工作者们，多年的努力探索，目前开辟了二条能够大规模生产替代冬虫夏草的途径，中科院微生物所的专家，通过对北冬虫夏草的菌株进行分离、纯化，得到了高活性的优良菌株，蛹虫草菌 ，并且研究出适宜于菌株生长发育的培养基配方、培养环境、培养条件等。
产品推向市场后，我们将把毛利定在一个适中的位置，同时保证较高质量的虫草产品以保持我们的品牌形象，不断以高质量的产品拓宽市场，同时注重保持与各地区药厂药房的联系与交流，及时了解使用虫草后的人群意见和建议，加强各部分科研院所的互动与伙伴关系。
二、公司介绍
介绍公司的主营产业、产品和服务、公司的竞争优势以及成立地点时间、所处阶段等基本情况。在介绍企业时，首先要说明创办新企业的思路，新思想的形成过程以及企业的目标和发展战略。其次，要交待企业现状、过去的背景和企业的经营范围。在这一部分中，要对企业
以往的情况做客观的评述，不回避失误。
（一）产品优势
1、质量优势
国家863高科技研究发展计划重点支持项目在国家项目优势上，冬虫夏草是唯一列入国家（863）高技术发展计划重点项目的产品，是代表国家生物资源替代开发的产品。国家（863）计划在同一领域只支持最领先的一家。同时还获得国家级新产品称号。 质量保证：虫草含量超过1.1%，比普通虫草高300%虫草素高达1.1%根据权威科研机构的检测数据，我们公司的虫草的虫草素含量要比普通冬虫夏草高300%。通过先进工艺将无菌培养以无菌方式进行分离，培养后不断筛选出活性物含量更高的虫草。再不断地精心呵护，进行驯化、培育。从产品的源头再到产品的生产过程，都使虫草具有最优的质量保证，而且质量稳定，属于稀有养生珍品。
2、技术优势
企业实力雄厚，合作盈利轻松与高科技、实力雄厚的企业合作，拥有完善的技术、产、销一条龙服务，确保你产销无忧、获利轻松！
北虫草经国内外专家多年来的研究表明，虫草素、虫草酸和虫草多糖是北冬虫夏草子实体中最主要的功效成分，且本身具有独立、明确的药用价值。可作为药品、营养补充剂、健康食品的成分和添加剂，具有很高的经济价值。而由于采挖过度，导致生长环境破坏，如今虫草的产量越来越少。
经由我公司专业技术人员和武汉各大院校知名生物专家教授，经过多年无数次研究与实验，先后完成冬虫夏草菌种选育及菌种培养基配方确定、工艺稳定性和产品含量的分析。并对其采用纯化诱导、驯化、分离、复壮等一系列生物技术手段而选育出优化菌种并通过改良技术，成功克隆出滋补虫草（北冬虫夏草）。
3、价格优势
现在的虫草以湖南的价格最高，价格为185544.2元/斤，而贵州地区的价格最低为79845.5元/斤。而东北三省内虫草价格最低的为吉林省82228.4元/斤。我们可以将价格定在80000元/斤，这样我们可以通过价格的优势打开市场，同时也不会低于全国最低的价格。【北虫草养殖方法】
（二）主营策略
人工培养蛹虫草的奥秘
虫草的新秀—人工虫草，包括人工培养的蛹虫草和冬虫夏草的子实体、虫草菌丝体等。由于蛹虫草中虫草素含量高，下面着重将蛹虫草所含的成分进行分类，分为膳食营养成分，其他主要营养成分，其中包括维生素、氨基酸以及矿物质元素，也将叙述最重要虫草特有保健功能成分
4-1
。
1蛹虫草膳食营养成分：最基本的膳食营养成分一般包括：热量、蛋白质、脂肪、
碳水化合物、膳食纤维等的含量。表4-1中列出了蛹虫草子实体100克中的膳食营养素含量。需要说明的是热量：人体不断在消耗能量，食物中蛋白质、脂肪和碳水化合物经过氧化产生热能供身体维持生命，热量在营养学中用"千卡"表示。1千卡是1000克水由15℃升高1度所需要的热量。
表4-1虫草子实体中主要膳食营养成分
表4-3 蛹虫草子实体中的氨基酸含量分析
3. 蛹虫草特有保健功能成分:
研究人员将野生蛹虫草和人工培养的蛹虫草子实体做了比较（如表4-5所示），发现人工培养的蛹虫草中的许多有效成分含量高于野生虫草或与之相近。
表 4-5 人工培养的蛹虫草和冬虫夏草中几种有效成分的比较
（1）虫草素：虫草的主要功效成分是虫草素(Cordycepin)，它也被称为3'-脱氧腺苷。早在1950年，德国科学家坎宁汉（Cunningham）等人就从蛹虫草菌人工培养的滤液中分离得到了虫草素。并将其定名为虫草素（Cordycepin），化学名定为3业公司，也从蛹虫草中提取出了高纯度标准品。虫草素作为一种新型广谱抗菌素，已引起全球科技发达国家的高度重视。但国外许多报告认为，这种成分的功能极其容易丧失，并认为，虫草素在体内，在腺苷脱氨酶（adenosine deaminase， ADA）的作用下快速脱氨基而成为无生物活性的代谢产物——3'-脱氧次黄嘌呤核苷，其余小部分则被磷酸化为三磷酸虫草素（为虫草素具有生物活性的成分）。虫草素在体内容易降解可能是它单独使用面临的一个难题。因此认为为了延缓虫草素在体内代谢时间,需要附加防脱氨基的侧链基团，或与 ADA 抑制剂联合施用，以稳定虫草素的结构。然而有报道认为ADA 抑制剂对人体有副作用，故影响了虫草素的使用。
我们发现，虫草素在两年内都不会变化，而且效果仍然表现良好。因而认为，可能是因为它和大分子多糖等营养物质互相保护、相互依附的结果。我国有报道认为，如将虫草素/脂质体包埋成球，能加强虫草素的长效性；又如制备成聚糖/虫草素纳米粒，对药物确实能起到保护、缓释及提高生物利用度的作用，而且无毒，价廉，也无任何副作用。经过人工培养虫草素含量可达20mg/g。直接利用富含虫草素的子实体效果也十分良好
4-3
。
1-7,8
对人工合成虫草素的方法虽然已经有不少研究报道，但由于合成工艺比
较复杂，收率较低，产物纯化较难，生产成本高，尚处于探索阶段，未形成工业化生产。目前虫草（尤其是蛹虫草）仍然是虫草素的主要来源
4-4,5
。
虫草素能抑制病毒的RNA合成： 还有抗疱疹病毒、脑炎病毒、艾滋病病毒的活性，对HIV-I型病毒有杀伤作用。尤其对多种实体恶性肿瘤有很强的抑制作用，能增强吞噬肿瘤细胞的能力，这种能力是硒的4倍。能改善放化疗后的呕吐恶心、胃口差、头发脱落等症状而未见有毒副作用。虫草素能提高人体免疫力，增加免疫细胞数量和活性。虫草素有调节中枢神经系统的功能，很可能成为一种治疗由炎症引起的中枢神经紊乱的药物。虫草素有抗抑郁、安神和镇静的作用，虫草素对情绪不稳定或情绪抑郁悲观具有缓解作用。虫草素能改善睡眠，晚上用药效果更为显著。虫草素的抗菌、抗病毒作用：能抗微生物感染。虫草素能抑制链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、败血症杆菌等病原菌的生长。虫草素的抗炎作用：炎症可以是感染引起的，也有些不是感染性炎症，如由于神经系统或内分泌失调造成的疼痛等，均有缓解作用。对虫草素作为新型广谱抗生素或生物医药的广泛开发应用，将成为全球生物医药领域发展重点
4-6
.。
（2）虫草多糖为多种糖类组成的多聚糖：产品含量为4-5%。对不同类型糖尿病均有降血糖效果，虫草多糖能抑制肝葡萄糖输出，提高肝脏葡萄糖代谢酶的活力。在肝中葡萄糖会消化掉一部分，起到降糖作用。虫草多糖具有保肝、养肝作用，可使纤维化组织逆转，虫草多糖能提高肝脏的解毒能力。虫草多糖保肾脏有助于尿蛋白、血清肌酐、血尿素氮等指数下降。虫草多糖具有养肺化痰的功效，对肺源性心脏病（肺血管慢性疾病造成肺动脉高压）有辅助疗效。虫草多糖能减少心肌缺血、心肌梗塞。有益于消化系统，克服便秘。
（3）虫草酸（D-甘露醇）：虫草酸在蛹虫草中含量为2%。虫草酸能有效预防和治疗脑血栓、脑溢血和肾功能衰竭，同时还具有利尿作用。虫草酸在临床用于降颅压和眼压、利尿及急性肾功能衰竭的治疗。可预防脑出血、心力衰竭，能补充血浆，改善人体微循环。虫草酸还可延缓细胞的衰老，抗肝组织纤维化，减轻组织水肿。减轻慢性肾脏病变及毒性物质对肾脏的损害。
（4）腺苷（腺嘌呤核苷）：蛹虫草中腺苷含量为0.02%,可以抗病毒、抗菌，抑制血小板积聚，防治血栓形成，还可消除面斑，抗衰、防皱。腺苷还有舒张血管平滑肌的作用，增加冠脉血流量，抑制血小板凝聚，提高心脏耐缺氧能力，参与血管扩张，参与心肌能量代谢 ，抵抗心律失常，同时，同时改善肾脏微循环和局部血流量，对肾衰有缓解作用。
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